WWW.REFERATCENTRAL.ORG.UA - Я ТУТ НАВЧАЮСЬ

... відкритий, безкоштовний архів рефератів, курсових, дипломних робіт

ГоловнаРізне → Застосування методу біохемілюмінесценції в токсикологічних дослідженнях (автореферат) - Реферат

Застосування методу біохемілюмінесценції в токсикологічних дослідженнях (автореферат) - Реферат

Ключові слова: біофізичні методи, біохемілюмінесценція, ксенобіотики, токсичність, гігієнічна регламентація.

АННОТАЦИЯ

Антюфеева О.И. Применение метода биохемилюминесценции в токсикологических исследованиях. Рукопись. Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук по специальности 03.00.02 – биофизика – Таврический национальный университет им. В.И. Вернадского, Симферополь, 2006.

Диссертация посвящена одной из важных проблем современной прикладной биофизики (медицинская и экологическая биофизика) - разработке количественных и качественных критериев в оценке влияния новых синтезированных токсических химических веществ на живые организмы. Впервые по показателям динамики БХЛ сыворотки крови экспериментальных животных при воздействии ксенобиотиками макроциклическим эфиром - 12 краун-4 ; неонолом АФ 9-12; метилцеллозольвом (МЦ); простым полиэфиром Л-402-2-100 в дозах ДЛ100, ДЛ50, ДЛ50, 1/5 ДЛ50, 1/10 ДЛ50 проведены комплексные исследования по выявлению степени токсификации организмов животных. Построены временные зависимости интенсивности БХЛ I (имп/с) сыворотки крови экспериментальных животных в течение среднеэффективного времени гибели животных ЕТ50, т.е. динамические кривые для каждого вида ксенобиотика. При этом нами введены следующие параметры: Іэф – величина интенсивности БХЛ к концу средне-эффективного времени гибели животных (ЕТ50); tm - время достижения максимальной интенсивности свечения; tg, tg* - тангенсы углов наклона восходящих и нисходящих ветвей динамических кривых; tк - время достижения контрольных значений интенсивности; Sк - светосумма свечения за время tк; к - коэффициент токсичности, определяемый для каждого из ксенобиотиков в соответствии с формулой к = tк / tm2. Значение интенсивности Іэф имело приблизительно одну и ту же величину для всех исследуемых ксенобиотиков, что позволяет выделить этот параметр как критериально значимый. Базируясь на этом, нами разработана классификация степеней тяжести токсификации животных: 1) абсолютно смертельная (при получении дозы ДЛ100) –интенсивность свечения Іэф 50100 имп/с (фоновые значения интенсивности); 2) очень тяжелая (при получении дозы ДЛ50) – Іэф 300 имп/с, примерно в 2 раза меньше интенсивности свечения контрольной группы животных (Ік); 3) тяжелая (при получении дозы ДЛ50) –Іэф 600 имп/с, приблизительно равна Ік; 4) средняя (при получении дозы 1/5 ДЛ50) - Іэф 900 имп/с, больше Ік примерно в 1,5 раза; 5) легкая степень (при получении дозы 1/10 ДЛ50) - Іэф 1500 имп/с, больше Ік в 2,3 раза. Для каждого из исследуемых ксенобиотиков выявлены органы-мишени с характерными хемилюминограммами.

Впервые определена степень кумуляции ксенобиотиков по разработанным оригинальным количественным критериям параметров динамических кривых БХЛ сыворотки крови лабораторных животных, затравленных дозами 1/5 ДЛ50 и 1/10 ДЛ50. Установлено, что динамические кривые БХЛ характеризуются последовательными тремя фазами: 1) резкое нарастание свечения до максимальных значений за время tm (от 0 до tm); 2) резкий спад интенсивностей БХЛ в течение времени tс (от tm до tс), причем, tm+tс соответствует средне-эффективному времени гибели животных (ЕТ50); 3) медленное уменьшение интенсивностей до значений интенсивностей свечения в контрольной группе в течение времени tк*. Временной интервал от начала наблюдения до достижения контрольных значений интенсивностей определяется как tк = tm + tс + tк*. Установлено, что при воздействии ксенобиотиков, обладающих слабыми кумулятивными свойствами, удлиняются времена фаз быстрого нарастания (tm) и быстрого спада (tс) интенсивности свечения; увеличиваются tg β нисходящей ветви динамической кривой и светосумма (S) свечения за одни сутки; сокращается время (tк*) фазы медленного снижения интенсивности БХЛ до контрольных значений по сравнению с чрезвычайно кумулятивными ксенобиотиками. Определено, что для слабокумулятивного (IV степень кумуляции) ксенобиотика простого полиэфира Л-402 tк и tgβ находятся в пределах - tк < 5 суток; среднекумулятивного (III степень кумуляции) метилцеллозольва - 5 суток ≤ tк < 6,5 суток; высоко кумулятивного (II степень кумуляции) неонола АФ9-12 - 6,5 суток ≤ tк < 8 суток и для ксенобиотика, обладающего чрезвычайно высокими кумулятивными свойствами (I степень кумуляции), макроциклического краун-эфира 12 краун-4 - tк > 8 суток. Данные показатели могут быть использованы для прогностической оценки кумулятивных свойств новых синтезируемых химических веществ при их гигиеническом нормировании. Показано, что при выявлении аллергенных и сенсибилизирующих свойств ксенобиотиков, как при внутрикожном тестировании, так и в подостром опыте при внутрижелудочном введении, интенсивность индуцированной и спонтанной БХЛ сыворотки крови является чувствительным тестом, реагирующим не только на вид ксенобиотика, но и на дозу и время его воздействия. Подтверждено, что методом БХЛ можно установить эффект кожно-резорбтивного действия (КРД) исследуемых веществ в более ранние сроки, чем биохимическими методами по функциональным сдвигам показателей периферической крови и ферментативных систем, что позволяет считать этот метод высокочувствительным, надежным, высоко информативным. Определена отрицательная корреляционная связь между стабильностью водных растворов ксенобиотиков и уровнем интенсивности их спонтанной и индуцированной хемилюминесценции (Ri = - 0,998). Установлено, что степень стабильности имеет логарифмическую зависимость от величины дозы ДЛ50. Значения интенсивности индуцированной и спонтанной ХЛ водных растворов ксенобиотиков являются прогностическим критерием оценки стабильности ксенобиотиков к гидролитическому окислению и биологической активности химических веществ. Показано, что методы БХЛ, фосфоресценции, микроэлектрофореза ядер клеток буккального эпителия адекватно отображают структурно-метаболические нарушения в организме при воздействии токсических химических факторов на производстве, что позволяет широко использовать эти методы для диагностики донозологических состояний в мониторинге "Окружающая среда – здоровье населения".

Ключевые слова: биофизические методы, биохемилюминесценция, ксенобиотики, токсичность, гигиеническая регламентация.

SUMMARY

Antyufeyeva О.I. Application of biochemiluminescent methods for toxicological researches. Manuscript. Thesis for the scientific degree of a candidate of biological sciences on specialty 03.00.02 - biophysics. –Tavrida National V.I. Vernadsky University, Simferopol, 2006.

The dissertation deals with one of the important problems of modern applied biophysics (medical and ecological biophysics) - the development of quantitative and qualitative criteria in an estimation of influence of the new synthesized toxic chemical substances on alive organisms.

At the first time the degree of intoxication of animals under the influence of lethal, toxic and subtoxic doses of xenobiotics has been estimated (absolutely mortal, extra heavy, heavy, moderate and light) according to definite the indices of biochemiluminescent (BChL) dynamics of experimental animals` blood serum. News is the quantitative criteria for parameters of dynamic BChL curves, determining a degree of xenobiotics cumulation, have been estimated in the present work. It has been revealed that at the indication of allergic and skin-resorbtical properties of xenobiotics the intensity of induced and spontaneous BChL of blood serum appears to be an apprehensible test, reacting not only at the kind of xenobiotics but also at the dose and time of its effect. The connection between stability of xenobiotic water solutions and ChL level has been defind. The application of biophysical methods in the estimation of the state of health of chemical units` staff has been substantiated: BChL, phosphorescences and microelectrophoresis of buccal epithelium cell kernels.

Keywords: biophysical methods, biochemiluminescent, xenobiotics, toxicity hygienical stability.

Loading...

 
 

Цікаве