WWW.REFERATCENTRAL.ORG.UA - Я ТУТ НАВЧАЮСЬ

... відкритий, безкоштовний архів рефератів, курсових, дипломних робіт

ГоловнаРізне → Кріоконсервування фрагментів органів ссавців і біологічна дія одержаних з них водно-сольових екстрактів (автореферат) - Реферат

Кріоконсервування фрагментів органів ссавців і біологічна дія одержаних з них водно-сольових екстрактів (автореферат) - Реферат

У роботі досліджено вплив умов кріоконсервування фрагментів органів (підшлункова залоза, печінка, селезінка) свиней та новонароджених поросят на їх збереження та склад одержуваних з цих фрагментів водно-сольових екстрактів. Показана висока кріопротекторна ефективність поліетиленоксидів при кріоконсервуванні фрагментів органів. Встановлено, що вихід речовин пептидної природи в розчин більший з фрагментів органів, кріоконсервованих під захистом поліетиленоксиду з м.м. 1500. Встановлено, що молекулярно-масовий розподіл пептидів в екстрактах залежить від органа та віку тварин.

Екстракт підшлункової залози нормалізує біохімічні показники при експериментальному цукровому діабеті, а екстракт печінки стимулює процеси репарації в ураженому органі при токсичному гепатиті та цирозі печінки. Уведення екстракту селезінки позитивно впливає на перебіг цукрового діабету, токсичного гепатиту та прискорює загоєння опікових ран. Суміш екстрактів сприяє гальмуванню росту карциноми Герена і збільшує тривалість життя щурів.

Ключові слова: кріоконсервування, фрагменти органа, екстракт, пептиди, цукровий діабет, токсичний гепатит, цироз печінки, рана, пухлина.

Гальченко С.Є. Криоконсервирование фрагментов органов млекопитающих и биологическое действие полученных из них водно-солевых экстрактов.-Рукопись.

Диссертация на соискание ученой степени доктора биологических наук по специальности 03.00.19 - криобиология.-Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины, Харьков-2007.

В работе исследовано влияние условий криоконсервирования фрагментов органов (поджелудочная железа, печень, селезенка) свиней и новорожденных поросят на их сохранность и состав получаемых из этих фрагментов водно-солевых экстрактов. Показана высокая криопротекторная эффективность полиэтиленоксидов при криоконсервировании фрагментов органов. Установлено, что выход веществ пептидной природы в раствор больше из фрагментов органов, криоконсервированных под защитой полиэтиленоксида с м.м. 1500. Определено, что молекулярно-массовое распределение пептидов в экстрактах зависит от органа и возраста животных.

Экстракт поджелудочной железы нормализует биохимические показатели при экспериментальном сахарном диабете, а экстракт печени стимулирует процессы репарации в пораженном органе при токсическом гепатите и циррозе печени. Введение экстракта селезенки положительно влияет на протекание сахарного диабета, токсического гепатита и сокращает сроки заживления ожоговых ран. Смесь экстрактов способствует торможению роста карциномы Герена и увеличивает продолжительность жизни крыс.

Ключевые слова: криоконсервирование, фрагменты органа, экстракт, пептиды, сахарный диабет, токсический гепатит, цирроз печени, рана, опухоль.

Galchenko S.E. Cryopreservation of mammals' organ fragments and the biological effect of obtained water-saline extracts.-Manuscript.

Thesis for conferring a scientific degree for Doctor of Biological Sciences, speciality 03.00.19 – cryobiology.-Institute for Problems of Cryobiology and Cryomedicine of the National Academy of Sciences of Ukraine, Kharkiv-2007.

The effect of cryopreservation conditions on the integrity of mature pigs' and newborn piglets' organ fragments (pancreas, liver, spleen) and on the composition of water-saline extracts derived from these fragments has been studied in the work. The biological effect of extracts has also been investigated under different pathological conditions.

The best preservation of pancreas fragments was observed under cryoprotection with DMSO and PEO-1500, the latter acting effectively in the wider range of cooling rates, while DMSO showed cryoprotective activity at 1єC/min. The cultured tissue responded adequately to the increase in glucose concentration up to stimulative indices (16.7 mmol/l), while low glucose level (5.6 mmol/l) led to the decrease in insulin production. Cryopreservation of pigs' and newborn piglets' liver fragments in the presence of polyethylene oxides led to the decrease of both endogenous respiration and coupling between respiration and oxidative phosphorylation. In 60 min in contrast to the decrease of native material respiration, the cryopreserved fragments showed respiration recovery. The increase of coupling between respiration and oxidative phosphorylation was also defined in cryopreserved fragments, but by 120 min these indices were lower than in the control.

Endogenous respiration of pigs' liver fragments cryopreserved with polyethylene oxides at 1єC/min did not differ significantly in comparison to the control. At the same time slight coupling between respiration and oxidative phosphorylation was defined both in the control and in cryopreserved material. By 60 min of incubation there were no changes in endogenous respiration intensity, although the normalization of respiration and oxidative phosphorylation coupling was identified. By 120 min a considerable decrease of the studied bioenergetic indices was observed both in the control and in cryopreserved fragments.

During extracts obtaining the maximum peptide concentration in the supernatant was defined after organ fragments preservation under PEO-1500 protection. The amount of peptides in the solution did not depend on cryoprotectant concentrations used. The significant decrease of peptide concentration in solution was observed during first 60 min of incubation. Extracts obtained from cryopreserved xenogenic organ fragments are characterised by presence of substances of peptide nature with wide spectra of molecular masses. These spectra are different for extracts derived from different organ fragments, and extracts composition also depends on animal age.

It was established that extracts' ingredients bind to blood serum albumin, and this binding could be regarded as one of the specific mechanisms of biologically active substances transportation to relevant organs and tissues.

Both newborn piglets' pancreas fragments and the extract derived from pigs' cryopreserved pancreas fragments promoted the decrease of glucose level in blood as well as the decrease of lipid peroxidation level in the organism of diabetic rats. In some instances the normalization of the studied indices was more noticeable under extract injection rather than under fragments application.

Extracts, obtained from cryopreserved fragments of pigs' and piglets' liver, stimulated reparative processes under diffuse diseases of liver. The effect of extracts manifested in the decrease of aminotransferase activity in blood serum of rats and also in the decrease of lipid peroxidation intensity both in the damaged liver and blood serum of animals. The normalisation of organ histological structure, the increase in number and diameter of functioning vessels as well as the increase in blood flow rate were also observed.

The local application of the extract of pigs' cryopreserved spleen fragments accelerated the healing of burns in experimental animals. This manifested in earlier eradication of wounds from microorganisms, shortening of inflammation phase time as well as earlier granulative tissue formation.

Extracts of pigs' cryopreserved liver fragments and pancreas fragments did not promote the normalisation of biochemical indices in the organism of rats under experimental diabetes mellitus and toxic hepatitis accordingly. The extract of pigs' cryopreserved spleen fragments promoted the normalisation of the studied indices under both pathological conditions.

Chronic injection of xenogenic organ extracts to young rats did not influence the animals' weight change, caused by physiological effects, and did not stimulate lipid peroxidation processes in the organism. The injection of extract mixture to 24-months old animals led to the decrease in lipid peroxidation intensity to the level observed in 6-months old animals. The lifetime of treated animals was prolonged.

The injection of extracts obtained from pigs' cryopreserved organs inhibited the tumour growth (Heren's carcinoma) and promoted the increase of the life in rats.

Key words: cryopreservation, organ fragments, extract, peptides, diabetes mellitus, toxic hepatitis, liver cirrhosis, burn, tumour.

Loading...

 
 

Цікаве