WWW.REFERATCENTRAL.ORG.UA - Я ТУТ НАВЧАЮСЬ

... відкритий, безкоштовний архів рефератів, курсових, дипломних робіт

ГоловнаРізне → Вивчення імунобіологічних властивостей збудника та розробка інактивованої вакцини проти вірусної діареї великої рогатої худоби (автореферат) - Реферат

Вивчення імунобіологічних властивостей збудника та розробка інактивованої вакцини проти вірусної діареї великої рогатої худоби (автореферат) - Реферат

Годовський О.В. Вивчення імунобіологічних властивостей збудника та розробка інактивованої вакцини проти вірусної діареї великої рогатої худоби. – Рукопис.

Дисертація на здобуття наукового ступеня кандидата ветеринарних наук за спеціальністю 16.00.03 – ветеринарна мікробіологія та вірусологія. ННЦ "Інститут експериментальної та клінічної ветеринарної медицини", Харків, 2007.

Дисертація присвячена вивченню епізоотичної ситуації в світі та розробці інактивованої вакцини проти вірусної діареї великої рогатої худоби. У роботі теоретично обґрунтовано необхідність розробки вітчизняної вакцини проти вірусної діареї великої рогатої худоби. Вивчено біологічні властивості різних штамів вірусу діареї та їх антигенну спорідненість, оптимізовано умови та режими культивування й інактивації штаму ВК–1 вірусу діареї, досліджено імуногормональну відповідь на щеплення живим та інактивованим вірусом діареї, підібрано ад'ювант. Досліджені гематологічні та біохімічні показники крові тварин, щеплених зразками вакцини. Визначено оптимальну імунізуючу дозу, тривалість напруженого імунітету та рівень антитіл до вірусу діареї у молозиві та молоці щеплених тварин. Вдосконалено метод титрування вірусу діареї та постановки реакції нейтралізації для визначення антитіл до вірусу діареї. Визначено термін придатності вакцини, її профілактичну ефективність. Розроблено нормативну документацію на вакцину та проведено її комісійні випробування.

Ключові слова: вірусна діарея великої рогатої худоби, вірус діареї, велика рогата худоба, реакція нейтралізації, інактивована вакцина, антигенні властивості.

Годовский А.В. Изучение иммунобиологических свойств возбудителя и разработка вакцины против вирусной диареи крупного рогатого скота. – Рукопись.

Диссертация на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук по специальности 16.00.03 – ветеринарная микробиология и вирусология. ННЦ "Институт экспериментальной и клинической ветеринарной медицины", Харьков, 2007.

Диссертация посвящена изучению эпизоотической ситуации в мире и разработке инактивированной вакцины против вирусной диареи крупного рогатого скота.

Установлено, что вирусная диарея крупного рогатого скота широко распространена в мире. Наибольшее распространение она получила в Европе (35 стран) и Америке (26 стран). Большинство стран Азии, по данным Международного епизоотического бюро, благополучны в отношении вирусной диареи крупного рогатого скота. Для профилактики вирусной диареи широко используют вакцинацию животных. В период с 1996-го по 2004-й год количество стран, в которых применяется вакцинопрофилактика против вирусной диареи крупного рогатого скота, выросло в 1,5 раза, а общее количество иммунизированных животных увеличилось в 126 раз.

В работе теоретически обоснована необходимость разработки отечественной инактивированной вакцины против вирусной диареи крупного рогатого скота. Изучены биологические свойства разных штаммов вируса диареи.

Проведено по 9 последовательных пассажей каждого штамма вируса диареи: Oregon С24V, ВК-1 и 25 в перевиваемых культурах клеток ТрТ, КСТ, ПТ и ПО. По результатами исследований штаммы ВК–1 и 25 вируса диареи на уровне 9-го пассажа в культурах клеток ТрТ и КСТ накапливались втитрах (7,380,05) lg ТЦД50/см3 и (7,080,21) lg ТЦД50/см3 соответственно. Специфичность цитопатогенного действия вируса была подтверждена в реакции имунофлуоресценции и полимеразной цепной реакции.

Изучено антигенное родство и различия между штаммами ВД. В результате исследований было установлено родство между штаммамиВК-1 и 25 на уровне 87 %, между штаммами ВК-1 и Oregon C24V – 83 %, а между штаммами Oregon C24V и 25 – 80 %. Антигенное отличие рассчитанное для этих штаммов, составило 4,9; 4,8 и 6,2 %, соответственно (В. А. Прискока и др., 1983). По результатам этих исследований штамм ВК-1 выбран для конструирования вакцины.

При изучении условий инактивации вируса диареи установлено, что оптимальная концентрация формальдегида составила 0,1 % с экспозицией 24 часа при температуре 37 °С.

Установлено отсутствие стимуляции функциональной активности щитовидной железы тиреотропним гормоном гипофиза в ответ на введение живого вируса диареи, что свидетельствует об иммуносупресивном действии живого вируса и отсутствии иммуносупресивного действия после его инактивации.

В результате проведенных на лабораторных животных и крупном рогатом скоте исследований по подбору адъюванта в составе вакцины было выбрано в качестве адъюванта кремниевую эмульсию "КЭ 10-01" в соотношении 60 % антигена к 40 % адъюванта.

С целью изучения свойств разработанного вакцинного препарата нами определена оптимальная иммунизирующая доза – 5 см3 для животных всех возрастных групп, продолжительность напряженного иммунитета у животных составила 6 месяцев (срок наблюдения). Установлено, что антитела к вирусу диареи находились в молозиве в максимальных титрах на уровне 6,8 log2 и постепенно снижались до контрольного уровня в молоке к 21-му дню после отела.

При биохимическом исследовании сывороток крови вакцинированного против вирусной диареи коров было установлено, что динамика изменений содержания общего белка коррелировала с ростом уровня иммуноглобулинов, что в свою очередь свидетельствовало о приросте количества общего белка за счет увеличения концентрации специфических антител. При этом концентрация альбуминов в сыворотке крови привитых животных в течение эксперимента достоверно не отличалась от контрольных значений.

Усовершенствован метод титрования вируса диареи и постановки реакции нейтрализации для определения антител к вирусу диареи, что позволило сократить расходы компонентов реакции в 5 раз. Определен срок пригодности вакцины, который составляет 12 месяцев. В комиссионном исследовании изучена профилактическая эффективность разработанной вакцины, подготовлена и утверждена нормативная документация на вакцину инактивированную против вирусной диареи крупного рогатого скота.

Ключевые слова: вирусная диарея крупного рогатого скота, вирус диареи, крупный рогатый скот, реакция нейтрализации, инактивированная вакцина, антигенные свойства.

Godowskiy O.V. Studying of immunobiological properties of the pathologic agent and development of inactivated vaccine against bovine viral diarrhea. – Manuscript.

Dissertation for Academic degree of Candidate of Veterinary Sciences, specialty – 16.00.03 – Veterinary Microbiology and Virology. NSC „Institute of Experimental and Clinical Veterinary Medicine", Kharkiv, 2007.

Dissertation is devoted to the study of epizootic situation and development of an inactivated vaccine against bovine viral diarrhea virus. The necessity of development of the Ukrainian inactivated vaccine against bovine viral diarrhea virushas been theoretically substantiated in this work. Biological properties of different strains of bovine viral diarrhea virus were studied. Conditions and regulations of the cultivation of bovine viral diarrhea virus were optimized; VK - 1 strain, antigenic congeniality, conditions of virus inactivation were studied. Immunohormonic response to inoculation of laboratory animals with active and inactive virus of bovine viral diarrhea virus and VK - 1 strain were investigated; an adjuvant was chosen. Hematological and biochemical indices in blood of rabbit, which had been vaccinated with the samples of an inactivated vaccine, were studied. An optimal immunized dose of the vaccine, duration of animals' expressed immunity and antibody level to the bovine viral diarrhea virus in inoculated animals' colostrums and milk was studied. The method for titration of the bovine viral diarrhea virus and the neutralization test for the determination of antibodies to the bovine viral diarrhea virus were improved. Keeping time of the vaccine was determined, prophylactic efficiency of the developed vaccine was studied. Technical documents on the inactivate vaccine for bovine viral diarrhea virus were developed and the commission tests were held.

Keywords: bovine viral diarrhea virus, bovine viral diarrhea, neutralization test, inactivated vaccine, antigenic properties.

Loading...

 
 

Цікаве