WWW.REFERATCENTRAL.ORG.UA - Я ТУТ НАВЧАЮСЬ

... відкритий, безкоштовний архів рефератів, курсових, дипломних робіт

ГоловнаРізне → Структурно-функціональні властивості гемаглютиніну і нейрамінідази різних штамів віруса грипу Н9N2 (автореферат) - Реферат

Структурно-функціональні властивості гемаглютиніну і нейрамінідази різних штамів віруса грипу Н9N2 (автореферат) - Реферат

Це становище продовжувалось до початку 2003 р., коли на протязі короткого часу відбулися заміни в усіх 4-х варіабельних позиціях. У позиціях 381 та 386 сталися повернення до Глі і Про, як і у референтного штаму, а в позиціях 312 і 346 – заміни Ілей → Вал та Глі → Ала відповідно. Одночасно нейрамінідазну реакцію починає гальмувати лише антисироватка до N2.

Таблиця 8

РГНА з антисироватками до NА і амінокислотні залишки, що входять до ії варіабельних ділянок

Штам вірусу,

дата ізоляції

Референтні

антисироватки

Номер позиції

312

346

381

386

Амінокислотний залишок

ty/wisconsin-66, 1966

б/N2

Ілей

Асн

Глі

Про

ty/90710/, 30.05.2000

б/N2, б/N3b

Ілей

Глі

Асп

Ала

ty/868/, 20.01.2002

б/N2, б/N3a

Ілей

Глі

Асп

Ала

ty/615/, 30.01.2002

б/N2, б/N3a

Ілей

Глі

Асп

Ала

ty/616/, 30.01.2002

б/N2, б/N3a

Ілей

Глі

Асп

Ала

ch/1304/, 05.05.2003

б/N2

Вал

Ала

Глі

Про

ch/1373/, 14.07.2003

б/N2

Вал

Ала

Глі

Про

ty/1562/, 28.12.2003

б/N2

Вал

Ала

Глі

Про

Перша заміна не змінює гідрофобність молекули NA порівнянно з такою референтного вірусу, але повертає підвищену рухомість пептидного ланцюгу в місці розташування Глі та компенсує ці зміни поверненням Про. Друга ж, за рахунок заміни Глі на Ала, дещо збільшує кількість гідрофобних ділянок в варіабельних частинах молекули NA. Виявлена втрата кросреактивності може виникати, скоріш за все, через повернення до сполучення Глі та Про в позиціях 381 та 386. Однак це не виключає, що і в інших ділянках цієї молекули відбулись не виявлені в роботі заміни, ялі теж вплинули на зникнення кросреактивності у вивчених штамів.

Отримані дані підтверджують попередні результати про витіснення у період між 2002 – 2003 р. "ранніх" штамів "пізніми" з новими функціональними властивостями.

Слід також підкреслити, що зміни ферментативної активності NA в ході епізоотії, скоріш за все, в певній мірі пов'язані з виявленими замінами амінокислотних залишків.

Еволюція досліджених штамів вірусів та їх філогенетичні зв'язки з іншими вірусами H9N2 птахів, ссавців і людини. Про еволюцію вірусів можна судити, виходячи з особливостей молекулярної еволюції їх білків та нуклеїнових кислот [С.Оно,1973; М.Кимура,1985]. Філогенетичний аналіз повної нуклеотидної послідовності гена HA 5-ти досліджених штамів вірусу H9N2 показав, що вони чітко поділяються на дві групи: "ранні" – ty/90710/30.05/2000, ch/786/07.12.2001, ty/965/17.03.2002 та "пізні" – сh/1304/05.05.2003 та ty/1562/28.12.2003.

На рис. 2 наведені еволюційні дерева HA та NA 16-ти досліджених штамів вірусу H9N2, ізольованих на протязі епізоотії. Вони побудовані на підставі порівняння амінокислотних послідовностей між позиціями 32–332 для HА, де знаходяться сайти розщеплення, рецептор-зв'язуючі та всі три антигенних сайти, і послідовностей між позиціями 242 – 433 для NA, що містять амінокислотні залишки, які входять до складу зв'язуючого та активного центрів ферменту.

Як бачимо, дані щодо молекулярної еволюції HА та NА недвозначно підтверджують попередні результати про те, що в ході епізоотії, у проміжок часу 2002 – 2003 років, відбулася заміна "ранніх" форм вірусу "пізніми", із зміненими структурно-функціональними властивостями.

При цьому, хоча загальний напрямок еволюції обох білків повністю співпадає, їх диференційні зміни дещо різняться, так що ступінь близькості первинних структур і HA, і NA в групах як "ранніх", так і "пізніх" штамів неоднакова (рис. 2).

Істотним для оцінки небезпеки досліджених штамів по відношенню до людини є, крім функціональних властивостей HА та NА, також і питання про місце цих штамів у філогенетичній ієрархії вірусів грипу H9N2. В Табл. 9 подані середні величини різниці між первинними структурами HА і NА 14 досліджених штамів у порівнянні з референтним штамом пташиного грипу і вірусом грипу A/Hong Kong/1073/99, ізольованим в 1999 році від людей у Гонконзі.

За амінокислотним складом HА ранні і пізні штами однаково віддалені від обох порівнюваних вірусів, а за амінокислотним складом NА вони трохи ближчі до ty/Wisсonsin-66, ніж до A/Hong Kong/1073/99, і, таким чином, знаходяться приблизно посередині між ними. Слід підкреслити, що ці дані вказують на близкість вивчених штамів до A/Hong Kong/1073/99 за повним амінокислотним складом обох білків і до того ж в середньому по всім штамам.

Таблиця 9

Середні відмінності між первинними структурами HА та NА досліджених штамів вірусу пташиного грипу H9N2, референтним штамом ty/Wisconsin-66 та вірусом Hong Kong/1073/99

Вірус

Штам вірусу, дата ізоляції

ty/Wisconsin-66

A/Hong Kong/1073/99

Амінокислотні заміни, %

НА

НА

Ранні

ty/90710/30.05.2000, ty/615/30.01.2002, ty/619/30.01.2002, ty/625/10.02.2002,

ty/810/25.12.2001, ch/811/7.12.2001

ty/965/17.03.2002

14,1

0,32**

5,2

0,51

17,3

0,45*

5,4

0,58

Пізні

ch/1308/12.05.2003, ch/1308/12.05.2003, ch/1376/14.07.2003,os/1436/04.11.2003,

ch/1475/0 8.12.2003, ty/1738/05.03.2004,

ch/1747/13.05.04

14,5

0,46**

4,9

0,28

19,6

1,05

5,3

0,52

Примітки: * – вірогідно відносно пізніх штамів (р < 0,05).

** – вірогідно відносно штаму A/Hong Kong/1073/99 (р < 0,05).

В той же час і серед ранніх, і серед пізніх штамів є розташовані набагато ближче до вірусів H9N2, що можуть інфікувати ссавців. Порівняння ділянок нуклеотидних послідовностей генів НА (позиції 172 – 551) та NA (позиції 718 – 1292) штамів ty/615/30.01.2002 i os/1436/30.10.2003 з такими ж послідовностями вірусів A/Kong Hong/1073/99 i A/sw/HK/10/98, що були вилучені із свиней у Китаї, показало 96% і 84% ідентичності відповідно. Саме в цих позиціях містяться нуклеотиди, які входять до складу функціонально-активних ділянок обох білків.

Таким чином, за своїм філогенетичним місцем серед вірусів H9N2, як і за функціональними властивостями, досліджені штами пташиного грипу є потенційно небезпечними для людини. Особливо це стосується "пізніх" штамів.

Loading...

 
 

Цікаве