WWW.REFERATCENTRAL.ORG.UA - Я ТУТ НАВЧАЮСЬ

... відкритий, безкоштовний архів рефератів, курсових, дипломних робіт

ГоловнаРізне → Структурно-функціональні властивості гемаглютиніну і нейрамінідази різних штамів віруса грипу Н9N2 (автореферат) - Реферат

Структурно-функціональні властивості гемаглютиніну і нейрамінідази різних штамів віруса грипу Н9N2 (автореферат) - Реферат

В позиції 327 знаходиться єдина заміна – Вал → Арг, за якою референтний штам відрізняється від усіх інших штамів H9N2. В результаті цієї заміни спорідненість вірусів до клітин ссавців, порівняльно з референтним вірусом, суттєво зросла, а до клітин птахів знизилась (Табл. 4).

Усі інші заміни у штамів, ізольованих на протязі епізоотії, відбулись в позиції 329, причому в хронологічному порядку вони мають практично регулярний характер: Сер → Асн → Ліз → Сер.

В період 05.2000 – 12.2001 р. штами, що мали в позиції 329 Сер та Асн, становили відповідно 3,3% та 4,9% від усіх штамів. З 12.2001 по 04.2003 р. відбулась заміна Сер на Ліз, і штами з Ліз становили 37,7%; з 02.2003 р. їх почали виштовхувати штами з Сер в цій позиції (54,1%). З 11.2003 р. і до кінця епізоотії виявляються лише ці штами.

Таблиця 3.

Амінокислотні залишки в позиціях 327 і 329 сайту розщеплення HA у штамів вірусу грипу H9N2

Позиція

Амінокислот-

ний залишок

Число

штамів

%

штамів

Дата ізоляції

327

Вал

1

100

1966 г., референтний вірус

327

Арг

61

100

30.05.2000-15.05.20004 р., усі штами

329

Сер

1

100

1966 р., референтний вірус

329

Сер

2

3,3

23.05.2000-30.05.2000 р., епізоотія

329

Асн

3

4,9

07.12.2001 р., епізоотиія

329

Ліз

23

37,7

19.12.2001.-21.01.2003 р.,

02.04., 30.10.2003 р., епізоотія

329

Сер

33

54,1

24.02.03- 15.05.04 р., епізоотія

Таким чином, усі штами, що вивчались, можемо розділити на дві групи – "ранні", з різними амінокислотами в позиції 329, та "пізні", у яких в цій позиції відбулось повернення до Сер. При цьому, як видно, у всіх "пізніх" штамів спорідненість до клітин МDCK вища, ніж до курячих еритроцитів.

Така зміна функціональних властивостей HА пояснюється характером амінокислотних замін, що відбулись. Більшість вірусів грипу, для яких характерна мала патогенність, мають в сайті розщеплення Арг, і саме він є місцем дії активуючих серинових протеіназ. В той же час штами, що мають більшу вірулентність та здібні переходити з птахів на ссавців, зазвичай мають в цьому сайті поліосновну послідовність [Lewis D.B., 2006]. Таким чином зміна Вал→Арг, що сталась після 1966 р. і зберігається у всіх вивчених пташиних штамів, принципово важлива, бо може забезпечити протеолітичну активацію HА в цій ділянці та розширити коло активуючих протеіназ. Поява в позиції 329 ще одного основного залишку, Ліз, однак, не зберіглась – еволюційний процес надав перевагу серину (можливо, в данному разі важливим було збереження амінокислотного залишку малого розміру).

Таблиця 4.

Первинна структура сайту розщеплення HA та середні значення показників кінетики адсорбції штамів вірусу пташиного грипу H9N2 на клітинахМDCK та курячих еритроцитах

Штам вірусу, дата ізоляції

Номер позиції, амінокислотий залишок

Клітини МDCK

Еритроцити курки

325

326

327

328

329

330

К, % /хв.

t50%, хв.

Кб

К, % /хв.

t50%, хв.

Кб

ty/wis-consin-66, 1966

Про

Ала

Вал

Сер

Сер

Арг

1,33+ 0,15

43,5+

3,8

0,0240,02

39,6+

4,2

1,2+

0,08

2,7

0,20

ty/90710/, 30.05. 2000

Про

Ала

Арг

Сер

Ліз

Арг

2,85*

+

0,25

25,2*

+

3,1

0,064*

0,09

28,6*

+

2,6

2,0*

+

0,23

0,83*

0,13

ty/615/, 30.01. 2002

Про

Ала

Арг

Сер

Ліз

Арг

ty/965/, 17.03. 2002

Про

Ала

Арг

Сер

Сер

Арг

3,02*

+

0,30

20,2*

+

1,8

0,172*

0,022

21,2*

+

2,11

2,7*

+

0,23

0,33*

0,03

сh/137314.07. 2003

Про

Ала

Арг

Сер

Сер

Арг

ty/1562/, 28.12. 2003

Про

Ала

Арг

Сер

Сер

Арг

ty/1747/, 15.05. 2004

Про

Ала

Арг

Сер

Сер

Арг

Примітки:* – вірогідно відносно референтного штаму (р < 0,05).

Еволюція структурно-функціональних властивостейNA. Результати вимірів температурної залежності нейрамінідазної активності при двох дозах вірусу, що відповідає різній концентрації ферменту, наведені в табл. 5.

Таблиця 5

Температурна залежність активності NA (од. оптичної густини) штамів вірусу грипу птахів

H9N2 та людини H2N2 і H3N2.

Штам вірусу,

дата ізоляції

Розве-

дення

Т0 С

15

25

37

42

56

ty/wisconsin- 66, 1966

1:32

0,220,02

0,240,03

0,52*0,06

0,700,08

0,270,04

1:100

0,170,02

0,200,02

0,36*0,03

0,550,05

0,260,03

ty/90710/, 30.05.2000

1:32

0,200,02

0,260,04

0,620,04

0,720,06

0,320,03

1:100

0,180,02

0,230,03

0,42*0,04

0,550,05

0,280,03

ty/965/,

17.03.2002

1:32

0,230,02

0,220,02

0,58*0,06

0,890,09

0,400,05

1:100

0,160,01

0,220,03

0,46*0,04

0,580,07

0,300,06

сh/1373/,

14.07.2003

1:32

0,150,01

0,210,02

0,480,06

0,550,08

0,270,03

1:100

0,110,01

0,160,02

0,320,04

0,300,03

0,240,03

ty/1562/,

28.12.2003

1:32

0,170,02

0,200,02

0,46*0,05

0,320,04

0,280,04

1:100

0,130,03

0,150,01

0,39*0,03

0,290,02

0,240,03

Singapore

/57, 1957

1:32

0,070,007

0,070,008

0,37*0,04

0,250,03

0,200,02

1:100

0,060,007

0,060,006

0,29*0,03

0,220,02

0,180,02

Hong Kong /68, 1968

1:32

0,080,006

0,080,007

0,30*0,04

0,220,02

0,220,03

1:100

0,070,008

0,080,007

0,27*0,03

0,200,02

0,170,02

Loading...

 
 

Цікаве